Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF4AI Plasmide Double Nickase (h): sc-402623-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- eIF4AI Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il eIF4AI Double Nickase Plasmid (h) e il eIF4AI Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EIF4A1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
eIF4AI Plasmide Double Nickase (h) | sc-402623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4AI Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A1 codifica l’elicasi di RNA DEAD-box eIF4AI umana, componente fondamentale del complesso di inizio della traduzione eIF4F, che svolge le 5′ UTR strutturate per consentire la scansione del complesso di pre-inizio 43S e il riconoscimento del codone di inizio. Controllando la traduzione cap-dipendente degli mRNA, eIF4AI influenza la proteostasi, la progressione del ciclo cellulare e programmi di adattamento allo stress, integrandosi con nodi di segnalazione che modulano l’inizio della traduzione, come le vie mTOR/4E-BP e MAPK. Alterazioni dell’attività di EIF4A1 e la dipendenza dalla traduzione guidata da eIF4A sono frequentemente studiate in contesti di crescita e sopravvivenza deregolate, inclusi programmi trascrizionali oncogenici e risposte allo stress. EIF4A1 viene inoltre sfruttato come punto di accesso meccanicistico per indagare la riprogrammazione della traduzione, la funzione delle elicasi di RNA e la traduzione selettiva di sottoinsiemi di mRNA complessi.
eIF4AI Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EIF4A1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EIF4A1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EIF4A1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EIF4A1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.