eIF2S3 Plasmide Double Nickase (h): sc-406266-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- eIF2S3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il eIF2S3 Double Nickase Plasmid (h) e il eIF2S3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EIF2S3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
eIF2S3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF2S3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2S3 codifica la subunità gamma del fattore eucariotico di inizio della traduzione 2 (eIF2γ), un componente centrale del complesso ternario eIF2 che trasporta il Met-tRNAi iniziatore alla subunità ribosomiale 40S durante l’inizio della traduzione cap-dipendente. eIF2S3 svolge un ruolo nel controllo della sintesi proteica globale e di programmi di traduzione selettivi collegati alla risposta integrata allo stress, in cui la fosforilazione di eIF2α modifica le dinamiche di inizio e riprogramma la traduzione degli mRNA. Attraverso queste vie, EIF2S3 influenza la proteostasi, la progressione del ciclo cellulare e l’adattamento allo stress in diversi tipi cellulari. L’alterazione genetica o la disregolazione di EIF2S3 è associata a fenotipi di neurosviluppo e a disturbi sindromici legati al cromosoma X, rendendolo rilevante per studi meccanicistici del controllo della traduzione in modelli pertinenti alla malattia.
eIF2S3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EIF2S3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EIF2S3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EIF2S3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EIF2S3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.