Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DR4 Plasmide Double Nickase (h): sc-400747-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DR4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DR4 Double Nickase Plasmid (h) e il DR4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TNFRSF10A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DR4 Antibody (B-9): sc-8411
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DR4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DR4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNFRSF10A codifica il recettore della morte 4 (DR4), un membro di superficie cellulare della superfamiglia dei recettori del TNF che lega TRAIL e avvia l’apoptosi estrinseca. In seguito al legame con il ligando, DR4 promuove l’assemblaggio del complesso di segnalazione induttore di morte e l’attivazione della caspasi-8, con crosstalk a valle verso l’amplificazione mitocondriale e risposte allo stress associate a NF-κB. La segnalazione di DR4 è integrata con vie che regolano le decisioni sul destino cellulare, inclusi apoptosi, segnalazione infiammatoria e sorveglianza immunitaria. Un’espressione alterata o un’attenuazione funzionale di TNFRSF10A è stata studiata in contesti di biologia tumorale e di resistenza a segnali associati all’apoptosi, nonché in una più ampia disregolazione delle reti di segnalazione dei recettori della morte.
DR4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TNFRSF10A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TNFRSF10A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TNFRSF10A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TNFRSF10A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.