Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
DEC2 Plasmide Double Nickase (m): sc-429771-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DEC2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DEC2 Double Nickase Plasmid (m) e il DEC2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bhlhe41. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DEC2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-429771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEC2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-429771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Bhlhe41** codifica il fattore di trascrizione **basic helix–loop–helix** **DEC2**, un regolatore dell’espressione genica dipendente dal contesto che integra la temporizzazione circadiana con i programmi di differenziamento cellulare. DEC2 partecipa a reti trascrizionali a valle del macchinario centrale dell’orologio biologico e modula processi quali la regolazione sonno–veglia, l’omeostasi metabolica e la repressione/attivazione trascrizionale specifica di linea. In contesti immunitari e stromali, **BHLHE41/DEC2** è stato collegato al controllo dei programmi citochinici e delle risposte trascrizionali associate all’ipossia, mettendolo in relazione con vie che modellano l’infiammazione e l’adattamento tissutale. Un’attività dis-regolata di DEC2 è stata associata ad alterazioni del fenotipo del sonno ed è stata studiata in modelli di stati patologici metabolici e immuno-correlati, in cui la trascrizione circadiana influenza la funzione cellulare.
DEC2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bhlhe41 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bhlhe41. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bhlhe41. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bhlhe41 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.