DDX37 Plasmide Double Nickase (h): sc-412866-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DDX37 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DDX37 Double Nickase Plasmid (h) e il DDX37 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DHX37. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DDX37 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412866-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX37 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412866-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHX37 codifica per l’elicasi dell’RNA umana DEAD-box DDX37, un enzima nucleolare che rimodella i complessi RNA–proteina durante la biogenesi dei ribosomi e la maturazione del pre-rRNA. DDX37 partecipa a fasi di svolgimento dell’RNA dipendenti dall’ATP necessarie alla maturazione della subunità piccola, collegando la sua attività all’omeostasi nucleolare, alla capacità di traduzione e alla progressione del ciclo cellulare. L’alterazione dell’assemblaggio ribosomiale mediato da elicasi dell’RNA può innescare segnali di stress nucleolare e cambiamenti estesi nel trascrittoma e nel proteoma. DHX37 è stato implicato in disturbi dello sviluppo gonadico ed è anche di interesse in ambito oncologico, dove le vie della biogenesi ribosomiale e del processamento dell’RNA vengono spesso rimodulate.
DDX37 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DHX37 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DHX37. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DHX37. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DHX37 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.