CPT1-C Plasmide Double Nickase (h): sc-402510-NIC

La carnitina palmitoiltransferasi 1C (CPT1C) codifica CPT1-C, un enzima omologo associato ai mitocondri e particolarmente espresso nel cervello, implicato nella regolazione della gestione degli acidi grassi a catena lunga e dei processi di sensing dei lipidi, più che nel flusso canonico della β-ossidazione. CPT1-C è collegata all’omeostasi energetica neuronale, alla funzione mitocondriale e alle risposte adattative alla disponibilità di nutrienti, che si intrecciano con il metabolismo degli acidi grassi e con le vie di stress cellulare. Alterazioni dell’espressione di CPT1C sono state riportate in diversi contesti tumorali e in modelli di malattie neurologiche, a sostegno dell’indagine su come il rimodellamento del metabolismo lipidico e la regolazione mitocondriale influenzino sopravvivenza cellulare, segnalazione e differenziamento. Di conseguenza, CPT1-C viene spesso studiata per il suo contributo all’adattamento metabolico, all’equilibrio redox e alla bioenergetica legata alla crescita nelle cellule umane.

CPT1-C Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CPT1C nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CPT1C. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CPT1C. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CPT1C interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.