COX11 Plasmide Double Nickase (h): sc-405874-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- COX11 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il COX11 Double Nickase Plasmid (h) e il COX11 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira COX11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
COX11 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405874-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COX11 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405874-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COX11 umano codifica un chaperone del rame conservato, localizzato nella membrana interna mitocondriale, indispensabile per la biogenesi della citocromo c ossidasi (complesso IV). COX11 partecipa alla consegna del rame al centro CuB di MT-CO1, sostenendo la fosforilazione ossidativa, il trasporto di elettroni e una produzione efficiente di ATP. L’alterazione di COX11 compromette l’assemblaggio della catena respiratoria e aumenta le risposte mitocondriali allo stress, che influenzano l’omeostasi redox e la riprogrammazione metabolica. La maturazione alterata del complesso IV e la disfunzione mitocondriale associate alle vie legate a COX11 sono rilevanti per studi su neurodegenerazione, miopatie e bioenergetica delle cellule tumorali.
COX11 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus COX11 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di COX11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di COX11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con COX11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.