CLIC2 Plasmide Double Nickase (h): sc-409129-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CLIC2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CLIC2 Double Nickase Plasmid (h) e il CLIC2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CLIC2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CLIC2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409129-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLIC2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409129-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLIC2 codifica per la proteina 2 del canale intracellulare del cloruro, un membro della famiglia CLIC coinvolto nell’omeostasi ionica e nella regolazione, sensibile allo stato redox, delle membrane intracellulari. CLIC2 è associato a processi quali il traffico endosomiale, la dinamica del citoscheletro e la modulazione della segnalazione dipendente dal calcio tramite interazioni con i recettori della rianodina nelle cellule eccitabili. Alterazioni dell’espressione o della funzione di CLIC2 sono state collegate a fenotipi neurosviluppativi e cardiovascolari, a supporto della sua rilevanza in studi su eccitabilità neuronale, fisiologia muscolare e segnalazione responsiva allo stress. Nei modelli cellulari umani, la perturbazione di CLIC2 può essere utilizzata per esplorare come il flusso intracellulare di cloruro e l’impalcatura associata ai canali influenzino il potenziale di membrana, la biologia delle vescicole e le risposte allo stress ossidativo.
CLIC2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CLIC2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CLIC2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CLIC2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CLIC2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.