CIS Lentiviral Activation Particles (m): sc-419665-LAC

Das murine Gen **Cish** kodiert das *cytokin-induzierbare SH2-haltige Protein* (CIS), einen Adaptor aus der SOCS-Familie, der als Feedback-Inhibitor der Signalübertragung von Zytokinrezeptoren wirkt. CIS bindet an phosphorylierte Rezeptormotive und assoziierte JAK-Kinasen, um die nachgeschaltete STAT-Phosphorylierung abzuschwächen, und prägt damit Signalausgänge von Signalwegen wie IL‑2/IL‑7 sowie verwandten γc‑Zytokinantworten. Durch die Regulation der Zytokinempfindlichkeit beeinflusst CIS Programme der Immunzellaktivierung, -proliferation und -differenzierung und ist daher für Forschungsfragen in Entzündung, Autoimmunität, Infektionsbiologie und Tumorimmunologie-Modellen relevant. Eine veränderte Cish-Aktivität wird entsprechend genutzt, um zu untersuchen, wie die negative Regulation der JAK–STAT-Signalgebung Zellzustandsübergänge und immunologische Effektorfunktionen **in vivo** und **in vitro** beeinflusst.

CIS Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cish-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CIS Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cish-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CIS-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cish-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.