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CIS慢病毒激活颗粒(m) | sc-419665-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Cish 基因编码细胞因子诱导的含 SH2 结构域蛋白(CIS)。CIS 属于 SOCS 家族的衔接/适配蛋白,可作为细胞因子受体信号传导的反馈抑制因子。CIS 能结合被磷酸化的受体基序及其相关的 JAK 激酶,从而削弱下游 STAT 的磷酸化,进而塑造诸如 IL-2/IL-7 以及相关 γc 家族细胞因子反应等通路的信号输出。通过调控对细胞因子的敏感性,CIS 影响免疫细胞的激活、增殖与分化程序;相关研究对炎症、自身免疫、感染生物学以及肿瘤免疫学模型具有重要意义。因此,改变 Cish 活性常用于探究 JAK–STAT 信号的负向调控如何在体内与体外影响细胞状态转换及免疫效应功能。
CIS 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Cish 表达。
CIS 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Cish转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CIS表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Cish 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。