CHCHD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-412127-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CHCHD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CHCHD2 Double Nickase Plasmid (h) e il CHCHD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CHCHD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CHCHD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412127-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHCHD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412127-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHCHD2 (coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain containing 2) codifica una proteina dello spazio intermembrana mitocondriale implicata nel mantenimento della respirazione mitocondriale e dell’architettura delle creste. Partecipa all’omeostasi redox e supporta la fosforilazione ossidativa influenzando il controllo di qualità delle proteine mitocondriali e programmi trascrizionali di adattamento allo stress. La funzione di CHCHD2 interseca la risposta mitocondriale alle proteine mal ripiegate (mitochondrial unfolded protein response) e la suscettibilità all’apoptosi attraverso effetti sull’efficienza della catena di trasporto degli elettroni e sulla segnalazione mediata dalle specie reattive dell’ossigeno. Alterazioni dell’attività di CHCHD2 sono state associate a neurodegenerazione e a una maggiore vulnerabilità cellulare allo stress mitocondriale, rendendolo rilevante per studi sul metabolismo energetico e sulla disfunzione mitocondriale.
CHCHD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CHCHD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CHCHD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CHCHD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CHCHD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.