Cdx1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402522
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cdx1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Cdx1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cdx1 Anticuerpo (D-4): sc-515146
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cdx1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402522 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CDX1 codifica el factor de transcripción homeobox de tipo caudal Cdx1, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer el eje anteroposterior y favorece la diferenciación del epitelio intestinal. Cdx1 actúa dentro de programas transcripcionales dirigidos por homeobox e interactúa con vías como la señalización Wnt/β-catenina, que moldean el desarrollo del intestino, las decisiones de destino celular y la identidad regional. Se han descrito alteraciones en la expresión de CDX1 en contextos de enfermedades gastrointestinales, incluida la biología tumoral colorrectal, donde la diferenciación desregulada y la señalización proliferativa son rasgos comunes. Como factor de transcripción asociado al linaje, CDX1 se utiliza con frecuencia para estudiar mecanismos de maduración epitelial, programas génicos tipo metaplasia y la remodelación de redes transcripcionales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cdx1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDX1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDX1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDX1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cdx1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDX1 para la investigación de la señalización de Cdx1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CDX1 críticos para la función de Cdx1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDX1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Cdx1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Cdx1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDX1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cdx1 (h) y el plásmido HDR Cdx1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDX1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDX1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.