CDK2AP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-406842-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CDK2AP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h) e il CDK2AP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CDK2AP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CDK2AP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406842-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDK2AP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406842-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDK2AP2 (proteina associata alla chinasi ciclina-dipendente 2, cyclin-dependent kinase 2 associated protein 2) è un piccolo fattore regolatorio implicato nel controllo della progressione del ciclo cellulare attraverso la modulazione dell’attività di CDK2 e della segnalazione dei checkpoint ciclina-dipendenti. Influenzando le transizioni dipendenti dalla fosforilazione al confine G1/S, CDK2AP2 contribuisce al controllo della proliferazione e al mantenimento della stabilità del genoma. Le reti regolatorie associate a CDK2 alterate sono spesso studiate nel contesto della deregolazione oncogenica del ciclo cellulare e dello stress replicativo, rendendo CDK2AP2 un nodo rilevante per l’analisi meccanicistica delle vie di controllo della crescita. Nelle cellule umane, la perturbazione di CDK2AP2 viene comunemente valutata insieme a readout quali l’ingresso in fase S, la segnalazione del danno al DNA e i cambiamenti nei programmi trascrizionali legati alla proliferazione.
CDK2AP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CDK2AP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CDK2AP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CDK2AP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CDK2AP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.