caspase-7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419468

Übersicht

Das Mausgen **Casp7** kodiert **Caspase-7**, eine ausführende Cystein-Aspartat-Protease, die während der intrinsischen und extrinsischen Apoptose nachgeschaltet von Initiator-Caspasen aktiviert wird. Nach der Prozessierung spaltet Caspase-7 zahlreiche zelluläre Substrate, treibt dadurch die charakteristische apoptotische Morphologie voran und trägt zu regulierten Zelltodprogrammen bei, die mit mitochondrialer Signalübertragung, Todesrezeptor-Signalwegen und Stress der Proteostase verknüpft sind. Die Aktivität von Caspase-7 ist über Crosstalk mit Caspase-Netzwerken mit entzündlicher und immunologischer Signalgebung verbunden und kann Gewebeumbau sowie Reaktionen auf zytotoxischen Stress beeinflussen. Eine fehlregulierte Apoptose unter Beteiligung von **CASP7** wurde mit Phänotypen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie, Neurodegeneration und immunvermittelte Pathologien relevant sind, was **Casp7** zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien zur Kontrolle von Zellschicksalen macht.

Das caspase-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Casp7-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Casp7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Casp7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die caspase-7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Casp7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der caspase-7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Casp7-Exone abzielen, die für die caspase-7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Casp7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom caspase-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom caspase-7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Casp7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das caspase-7 HDR-Plasmid (m) und caspase-7 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Casp7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Casp7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.