Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CA XII Plasmide Double Nickase (h): sc-404149-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CA XII Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CA XII Double Nickase Plasmid (h) e il CA XII Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CA12. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CA XII Antibody (D-2): sc-374314
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CA XII Plasmide Double Nickase (h) | sc-404149-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CA XII Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404149-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’anidrasi carbonica XII (CA XII), codificata dal gene umano **CA12**, è una metalloenzima transmembrana dipendente dallo zinco che catalizza l’idratazione reversibile della CO₂ a bicarbonato e protoni, contribuendo alla regolazione del pH extracellulare e pericellulare. Collegando la disponibilità di bicarbonato e la gestione dei protoni ai processi di trasporto di membrana, CA XII contribuisce all’omeostasi acido-base cellulare, al trasporto ionico epiteliale e all’adattamento metabolico in condizioni variabili di ossigeno e nutrienti. L’espressione di **CA12** è spesso deregolata in microambienti ipossici e soggetti a stress metabolico, dove un controllo del pH alterato può influenzare adesione cellulare, migrazione e segnalazione. Queste caratteristiche rendono CA XII un bersaglio utile per studiare vie dipendenti dal pH e cambiamenti della fisiologia tissutale associati a malattie.
CA XII Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CA12 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CA12. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CA12. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CA12 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.