Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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BRD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-402584-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BRD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BRD2 Double Nickase Plasmid (h) e il BRD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BRD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: BRD2 Antibody (G-4): sc-393720
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BRD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402584-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402584-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BRD2 (bromodomain containing 2) è un membro della famiglia BET di proteine “reader” epigenetiche che si lega ai residui di lisina acetilata sulle code istoniche tramite bromodomini tandem per regolare programmi trascrizionali. Attraverso interazioni con la cromatina e con complessi trascrizionali, BRD2 contribuisce all’espressione genica dipendente dalla RNA polimerasi II, alla progressione del ciclo cellulare e alla segnalazione in risposta agli stimoli, incluse le vie infiammatorie e quelle associate allo stress. L’occupazione della cromatina dipendente da BRD2 influenza l’attività di enhancer e promotori, collegando gli stati di acetilazione degli istoni a un controllo coordinato di proliferazione e differenziazione. Una segnalazione BET disregolata, inclusa un’alterata attività di BRD2, è stata associata a reti trascrizionali oncogeniche e alla biologia di malattie immuno-mediate in sistemi sperimentali.
BRD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BRD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BRD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BRD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BRD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.