BPTF Plasmide Double Nickase (m): sc-431488-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BPTF Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BPTF Double Nickase Plasmid (m) e il BPTF Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Bptf. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BPTF Plasmide Double Nickase (m) | sc-431488-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BPTF Plasmide Double Nickase (m2) | sc-431488-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Bptf codifica il Bromodomain PHD Finger Transcription Factor (BPTF), una subunità centrale del complesso di rimodellamento della cromatina NURF che riconosce le modifiche istoniche e regola il posizionamento dei nucleosomi per controllare l’espressione genica. Nelle cellule murine, BPTF contribuisce a programmi trascrizionali che governano proliferazione, specificazione di linea e patterning dello sviluppo, coordinando l’accessibilità della cromatina a livello di promotori ed enhancer. Tramite il suo bromodominio e il dominio PHD finger, BPTF integra segnali epigenetici con reti di fattori di trascrizione, influenzando processi quali la trascrizione su stampo di DNA e l’organizzazione della cromatina. Un’attività di BPTF deregolata è implicata in stati della cromatina alterati e in output trascrizionali anomali, rilevanti per la biologia del cancro e per altre malattie legate a una disregolazione epigenetica.
BPTF Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Bptf nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Bptf. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Bptf. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Bptf interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.