Date published: 2026-7-14

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Bmx Plasmide Double Nickase (h): sc-401550-NIC

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Schede Tecniche
  • Specie Target: human
  • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
  • Bmx Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
  • Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
  • Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
  • Il Bmx Double Nickase Plasmid (h) e il Bmx Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BMX. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
  • In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Bmx Antibody (C-4): sc-376686
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    Bmx Plasmide Double Nickase (h)

    sc-401550-NIC
    20 µg
    $410.00

    Bmx Plasmide Double Nickase (h2)

    sc-401550-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    BMX codifica la tirosin-chinasi non recettoriale Bmx (bone marrow kinase sul cromosoma X), un membro della famiglia Tec che integra segnali provenienti da recettori tirosin-chinasici, recettori per citochine e integrine. Bmx contribuisce a cascate di fosforilazione che modulano processi associati a PI3K–AKT, MAPK/ERK, STAT e NF-κB, influenzando la sopravvivenza cellulare, la dinamica del citoscheletro, l’adesione e la migrazione. È espressa in molteplici contesti ematopoietici ed endoteliali e può modellare risposte infiammatorie e angiogeniche tramite programmi trascrizionali a valle. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di BMX sono state associate a reti di segnalazione oncogeniche e alla biologia del microambiente tumorale, a supporto del suo studio in modelli di cancro, biologia vascolare e segnalazione immunitaria.

    Bmx Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BMX nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BMX. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BMX. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

    Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BMX interrotto.

    Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.