beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419026

Panoramica

Adrb1 codifica il recettore β1-adrenergico del topo (ADRB1/β1-AR), un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) che si accoppia principalmente a Gs per stimolare l’adenilato ciclasi, aumentare i livelli di cAMP e attivare la segnalazione dipendente da PKA. Nel cuore e in altri tessuti eccitabili, il β1-AR regola cronotropismo, inotropismo e adattamento metabolico attraverso la fosforilazione di canali ionici e proteine coinvolte nella gestione del Ca2+, con ulteriori interazioni tra vie di segnalazione tramite desensibilizzazione mediata da GRK/arrestina e internalizzazione del recettore. La deregolazione della segnalazione β-adrenergica e le alterazioni dell’espressione o della funzione di ADRB1 sono implicate in modelli di risposte allo stress cardiovascolare, nel rimodellamento associato all’insufficienza cardiaca e nell’aritmogènesi, e influenzano anche la lipolisi degli adipociti e il controllo neuro-umorale. In quanto nodo centrale della segnalazione catecolaminergica, ADRB1 è ampiamente utilizzato per studiare la dinamica della segnalazione dei GPCR, il trafficking recettoriale e i programmi trascrizionali a valle.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Adrb1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Adrb1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Adrb1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Adrb1 per lo studio della segnalazione di beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Adrb1 critici per la funzione di beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Adrb1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Adrb1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Adrb1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Adrb1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.