BCMO1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405374-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- BCMO1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il BCMO1 Double Nickase Plasmid (h) e il BCMO1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BCO1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
BCMO1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405374-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BCMO1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405374-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **BCO1** codifica la **β-carotene 15,15′-monoossigenasi 1 (BCMO1)**, un enzima citosolico che catalizza la scissione centrale del **β-carotene** introdotto con la dieta, generando **retinale**, un precursore diretto dell’**acido retinoico**. Attraverso il controllo della disponibilità dei retinoidi, BCMO1 influenza programmi trascrizionali dipendenti dall’acido retinoico che regolano la differenziazione epiteliale, lo sviluppo embrionale e l’omeostasi immunitaria e metabolica. L’attività di BCO1 si intreccia con le vie di assorbimento dei carotenoidi e di gestione dei lipidi, collegando lo stato nutrizionale alla segnalazione mediata dai recettori nucleari. Alterazioni del metabolismo dei carotenoidi e dei retinoidi sono state associate alla variabilità dello stato della vitamina A e a tratti rilevanti per la fisiologia oculare e metabolica, rendendo BCO1 un bersaglio utile per studi meccanicistici.
BCMO1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BCO1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BCO1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BCO1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BCO1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.