ARH2 Plasmide Double Nickase (m): sc-433335-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARH2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARH2 Double Nickase Plasmid (m) e il ARH2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Adprhl1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARH2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433335-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARH2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-433335-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adprhl1 del topo codifica ARH2, una proteina simile a un’ADP-ribosilidrolasi implicata nel turnover o nel riconoscimento dei segnali di ADP-ribosilazione che collegano il metabolismo cellulare alle risposte allo stress. L’ADP-ribosilazione interagisce con la segnalazione del danno al DNA, la regolazione della cromatina e il controllo trascrizionale, collegando i processi associati ad ARH2 alla stabilità del genoma e all’omeostasi cellulare. Nei sistemi sperimentali, l’alterazione della segnalazione dell’ADP-ribosio è spesso associata a modifiche della sopravvivenza cellulare, della segnalazione infiammatoria e del rimodellamento di funzioni citoscheletriche o mitocondriali, rendendo Adprhl1 un nodo utile per la dissezione delle vie di segnalazione. Questi collegamenti forniscono un contesto rilevante per la malattia per studiare come la regolazione dipendente dall’ADP-ribosio contribuisca a fenotipi cardiometabolici e neurobiologici, senza implicare esiti clinici.
ARH2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Adprhl1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Adprhl1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Adprhl1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Adprhl1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.