Arc Plasmide Double Nickase (h): sc-400231-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Arc Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Arc Double Nickase Plasmid (h) e il Arc Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ARC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Arc Antibody (C-7): sc-17839
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Arc Plasmide Double Nickase (h) | sc-400231-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Arc Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400231-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARC codifica la proteina associata al citoscheletro regolata dall’attività (Arc), prodotto di un gene a risposta immediata che collega l’attività neuronale al rimodellamento sinaptico. Arc regola l’endocitosi dei recettori AMPA, la dinamica del citoscheletro di actina e il traffico dei componenti postsinaptici, contribuendo così a modellare il potenziamento/depressione a lungo termine e lo scaling sinaptico omeostatico. Attraverso interazioni con i macchinari endocitici e citoscheletrici, Arc integra la segnalazione a valle della neurotrasmissione glutamatergica e delle vie calcio-dipendenti per modulare la plasticità dipendente dall’esperienza. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ARC sono state associate a meccanismi rilevanti nella ricerca neuropsichiatrica e neurodegenerativa, inclusi la disregolazione della connettività sinaptica e processi legati alla memoria.
Arc Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ARC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ARC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ARC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ARC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.