apoF Plasmide Double Nickase (h): sc-407655-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apoF Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apoF Double Nickase Plasmid (h) e il apoF Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APOF. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apoF Plasmide Double Nickase (h) | sc-407655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoF Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOF codifica l’apolipoproteina F (apoF), una glicoproteina secreta associata alle particelle HDL e LDL che modula il rimodellamento delle lipoproteine e il trasporto del colesterolo. apoF influenza i processi di scambio lipidico nel plasma, inclusi i percorsi collegati all’attività della lecitina–colesterolo aciltransferasi e alla rimozione mediata dai recettori delle lipoproteine, contribuendo così a plasmare l’omeostasi lipidica sistemica. Variazioni nell’espressione e nella funzione di APOF sono state associate ad alterazioni dei profili lipidici circolanti e a tratti di rischio cardiometabolico, rendendolo rilevante per lo studio dei meccanismi legati alla dislipidemia. In modelli cellulari e animali, APOF rappresenta un nodo sperimentale gestibile per indagare la biologia delle HDL, la gestione epatica dei lipidi e le interazioni gene–ambiente che influenzano il metabolismo lipidico.
apoF Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APOF nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APOF. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APOF. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APOF interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.