apoC-III Plasmide Double Nickase (h): sc-403887-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apoC-III Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apoC-III Double Nickase Plasmid (h) e il apoC-III Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APOC3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: apoC-III Antibody (8H7): sc-293227
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apoC-III Plasmide Double Nickase (h) | sc-403887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoC-III Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’APOC3 umano codifica l’apolipoproteina C-III (apoC-III), un’apolipoproteina secreta che si associa alle lipoproteine ricche di trigliceridi e modula il trasporto e la clearance dei lipidi plasmatici. L’apoC-III influenza l’attività della lipoproteina lipasi e le vie di captazione epatica, contribuendo così a determinare il metabolismo dei trigliceridi e il rimodellamento delle particelle VLDL/IDL all’interno della più ampia rete del metabolismo delle lipoproteine. Alterazioni dell’espressione o della funzione di APOC3 sono associate a una disregolazione dell’omeostasi dei trigliceridi e a fenotipi cardiometabolici legati ai lipidi, rendendolo un bersaglio rilevante per studi sulla secrezione epatica, sull’elaborazione delle lipoproteine e sul bilancio energetico sistemico. Nei modelli cellulari, la regolazione di APOC3 interseca programmi trascrizionali di sensing dei nutrienti e i processi di traffico secretorio degli epatociti che governano la produzione di apolipoproteine.
apoC-III Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APOC3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APOC3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APOC3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APOC3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.