Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) AMPK alpha 2: sc-400277-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)AMPK alpha 2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa AMPK alpha 2 (h) y el plásmido de doble nickasa AMPK alpha 2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PRKAA2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) AMPK alpha 2 | sc-400277-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) AMPK alpha 2 | sc-400277-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRKAA2 codifica la subunidad catalítica α2 de la proteína quinasa activada por AMP (AMPK), un sensor central del estado energético celular que se activa por AMP/ADP y por quinasas aguas arriba como LKB1. AMPKα2 coordina la adaptación metabólica al regular vías que controlan la captación de glucosa, la oxidación de ácidos grasos, la autofagia y la biogénesis mitocondrial, a la vez que restringe la señalización anabólica a través de dianas que incluyen mTORC1. En células humanas, la señalización dependiente de PRKAA2 contribuye a las respuestas al estrés durante la limitación de nutrientes y la hipoxia, y modula programas transcripcionales que influyen en la proliferación y la supervivencia. La desregulación de la actividad de AMPKα2 se ha vinculado con trastornos metabólicos y con la remodelación metabólica asociada al cáncer, lo que convierte a PRKAA2 en un nodo frecuentemente estudiado en redes de homeostasis energética y señalización de estrés.
AMPK alpha 2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PRKAA2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PRKAA2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PRKAA2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PRKAA2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.