ACSL1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420278-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ACSL1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ACSL1 Double Nickase Plasmid (m) e il ACSL1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Acsl1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ACSL1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-420278-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Acsl1** codifica l’acil-CoA sintetasi a catena lunga, membro 1 (ACSL1), un enzima che converte gli acidi grassi liberi a catena lunga nei corrispondenti tioesteri acil-CoA, un passaggio di controllo che impegna i lipidi nel metabolismo a valle. ACSL1 sostiene la β-ossidazione mitocondriale, l’accumulo e il rimodellamento dei lipidi e, più in generale, l’omeostasi energetica controllando la disponibilità di acil-CoA per vie che includono la sintesi dei trigliceridi, il turnover dei fosfolipidi e il catabolismo degli acidi grassi. Nei tessuti metabolicamente attivi e nei contesti delle cellule immunitarie, l’attività di ACSL1 influenza la segnalazione guidata dai lipidi e i programmi infiammatori, collegando la regolazione di **Acsl1** alle risposte allo stress metabolico. Un’espressione o un’attività alterata di ACSL1 è associata a fenotipi di metabolismo lipidico disfunzionale, rilevanti per modelli murini di insulino-resistenza, steatosi e malattie cardiometaboliche.
ACSL1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Acsl1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Acsl1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Acsl1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Acsl1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.