ABHD7 Plasmide Double Nickase (h): sc-408425-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABHD7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABHD7 Double Nickase Plasmid (h) e il ABHD7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EPHX4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABHD7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408425-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABHD7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408425-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD7 umano (citato anche come EPHX4) codifica un’idrolasi a serina contenente un dominio α/β-idrolasi, che si prevede partecipi al metabolismo di lipidi ed esteri nelle membrane cellulari. In quanto membro della più ampia rete delle idrolasi a serina, l’attività di ABHD7 può influenzare la dinamica della segnalazione lipidica, l’omeostasi di membrana e il crosstalk metabolico che modula le risposte allo stress e la segnalazione infiammatoria. Un’alterata regolazione degli enzimi del metabolismo lipidico è spesso associata a proliferazione deregolata, gestione dello stress ossidativo e cambiamenti nelle transizioni di stato cellulare, rendendo ABHD7 un nodo rilevante per studi meccanicistici sul rimodellamento metabolico e della segnalazione. La caratterizzazione della funzione di ABHD7 supporta la ricerca sui pathway lipidici legati agli enzimi e sulle loro connessioni con fenotipi cellulari associati a malattia in modelli umani.
ABHD7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EPHX4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EPHX4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EPHX4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EPHX4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.