ABHD3 Plasmide Double Nickase (h): sc-414947-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABHD3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABHD3 Double Nickase Plasmid (h) e il ABHD3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABHD3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABHD3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-414947-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABHD3 umano (abhydrolase domain containing 3) è un’idrolasi della serina che contribuisce al catabolismo lipidico idrolizzando fosfolipidi ossidati e a catena media, inclusi substrati lisofosfolipidici, influenzando così il rimodellamento dei lipidi di membrana e la segnalazione derivata dai lipidi. Attraverso la regolazione dell’omeostasi dei fosfolipidi, ABHD3 interagisce con vie che governano le risposte allo stress ossidativo, la segnalazione infiammatoria e la dinamica delle membrane degli organelli. Un’alterazione dell’espressione o dell’attività di ABHD3 è stata riportata in diversi contesti di disregolazione metabolica e biologia tumorale, in cui cambiamenti nella composizione fosfolipidica possono influenzare proliferazione, migrazione e tolleranza allo stress cellulare. Di conseguenza, ABHD3 è spesso studiata in analisi a livello di sistema del metabolismo lipidico, della biologia redox e delle reti di segnalazione associate alle membrane.
ABHD3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABHD3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABHD3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABHD3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABHD3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.