AAT-1 Plasmide Double Nickase (h): sc-410225-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- AAT-1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il AAT-1 Double Nickase Plasmid (h) e il AAT-1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAATS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
AAT-1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-410225-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AAT-1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-410225-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAATS1 codifica la proteina umana AAT-1, un presunto regolatore dell’adattamento allo stress cellulare e dell’organizzazione del citoscheletro, studiato per il suo ruolo nel mantenimento dell’omeostasi intracellulare. I processi associati ad AAT-1 sono stati collegati al controllo trascrizionale e ai percorsi di controllo della qualità proteica che influenzano proliferazione, segnalazione di sopravvivenza e rimodellamento cellulare. Un’espressione deregolata di MAATS1 o alterazioni della funzione di AAT-1 sono state investigate in relazione a fenotipi rilevanti per la malattia, tra cui un controllo della crescita alterato e una maggiore sensibilità allo stress, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici. Nei modelli cellulari, MAATS1 viene comunemente analizzato per collegare l’attività delle vie di segnalazione agli esiti fenotipici, come morfologia, vitalità e risposta a agenti perturbanti.
AAT-1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAATS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAATS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAATS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAATS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.