Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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11β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401400-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- 11β-HSD2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase 11β-HSD2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase 11β-HSD2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSD11B2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:11β-HSD2 Anticorpo (C-9): sc-365529
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
11β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401400-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
11β-HSD2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401400-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSD11B2 codifica a 11β-hidroxiesteroide desidrogenase humana do tipo 2 (11β-HSD2), uma oxidorredutase dependente de NAD+ que inativa o cortisol em cortisona e, assim, protege a sinalização do recetor de mineralocorticoides contra o excesso de glicocorticoides. Esta enzima é um determinante-chave do metabolismo pré-recetor de hormonas esteroides e contribui para a homeostase de eletrólitos em epitélios sensíveis a mineralocorticoides, incluindo rim e cólon. Alterações na expressão ou na atividade de HSD11B2 estão associadas a desregulação da sinalização por corticosteroides e a fenótipos consistentes com excesso aparente de mineralocorticoides, tornando-o relevante para estudos da biologia da hipertensão e da regulação endócrina. A 11β-HSD2 também é investigada na placenta e em tecidos vasculares pelo seu papel em moldar a exposição local a glicocorticoides e os programas transcricionais a jusante.
11β-HSD2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSD11B2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSD11B2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSD11B2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSD11B2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.