Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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β-2-Microglobulin Plasmide Double Nickase (m): sc-419281-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- β-2-Microglobulin Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il β-2-Microglobulin Double Nickase Plasmid (m) e il β-2-Microglobulin Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira B2m. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: β-2-Microglobulin Antibody (G-10): sc-46697
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
β-2-Microglobulin Plasmide Double Nickase (m) | sc-419281-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
β-2-Microglobulin Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419281-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
B2m codifica la β-2-microglobulina, un componente non covalente essenziale dei complessi MHC di classe I, necessario per il corretto ripiegamento e la presentazione sulla superficie cellulare degli antigeni peptidici. Attraverso il suo ruolo nell’elaborazione e nella presentazione dell’antigene, la β-2-microglobulina supporta il riconoscimento da parte delle cellule T CD8+ e contribuisce alla sorveglianza immunitaria e alla tolleranza. Alterazioni dell’espressione o della funzione di B2m possono rimodellare gli immunopeptidomi e modulare la segnalazione infiammatoria in contesti quali infezioni, autoimmunità ed evasione immunitaria tumorale. Nei modelli murini, B2m è ampiamente utilizzato per studiare lo sviluppo dei linfociti dipendente da MHC I, l’omeostasi immunitaria periferica e i meccanismi di immunoediting.
β-2-Microglobulin Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus B2m nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di B2m. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di B2m. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con B2m interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.